Moleküler klonlama ile aktarılan geni tespit etmeyi, ifade seviyesini ve protein ekspresyonunu belirlemeyi bilir.
Elde edilen rekombinant organizma ile deneysel çalışmalar yapmayı bilir.
Gerçek zamanlı kantitatif polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) (qRT-PCR) ile ekspresyon analizini bilir ve çıkan sonuçları yorumlayabilir.
Veriliş Biçimi
Yüz Yüze
Önkoşullar
Yok
Önerilen Dersler
Yok
Ders Tanımı
Bu derste, moleküler klonlamanın temel prensipleri, klonların taranması ve hedef genin ifadelenme analizleri ile ilgili temel deneysel protokollerin öğrenilmesini ve bu tekniklere dair pratik bilgi kazanımı amaçlanmaktadır.
Ders İçeriği
HAFTA
KONULAR
1. Hafta
Ders tanıtımı ve hedef genin çoğaltılması için primer tasarımı
2. Hafta
Kompetan hücre hazırlığı
3. Hafta
Hedef genin çoğaltılması (PCR)
4. Hafta
Plazmid izolasyonu (vektör eldesi)
5. Hafta
Gen ve plazmitlerin kesilmesi (RE kesim)
6. Hafta
Ligasyon
7. Hafta
Transformasyon
8. Hafta
Klonların taranması (Koloni PCR)
9. Hafta
Pozitif kolonilerin doğrulanması
10. Hafta
Kolonilerde fonksiyonel analiz, rekombinant protein üretimi
11. Hafta
qRT-PCR
12. Hafta
Ödev sunumu
13. Hafta
Ödev sunumu
14. Hafta
Ödev sunumu
Kaynaklar
Gene Cloning and DNA Analysis: An Introduction. T.A. Brown. Sixth/Seventh Edition.
Molecular Biotechnology, Principles and Applications of Recombinant DNA. Bernard R. Glick, Jack J. Pasternak, ASM Press, Washington, D.C., 2009.
